G418簡(jiǎn)介

康寧的細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品組合包括一系列抗生素和抗真菌試劑產(chǎn)品，其中一些抗生素會(huì)改變關(guān)鍵酶的活性，還有一些則是通過(guò)改變細(xì)胞通透性發(fā)揮作用。這些產(chǎn)品可以滿(mǎn)足從殺菌到抑菌的

多種需求，如預(yù)防性控制細(xì)菌、真菌、支原體或酵母菌造成的污染，為細(xì)胞培養(yǎng)提供適合的環(huán)境；也可用于微生物/哺乳動(dòng)物細(xì)胞的篩選性培養(yǎng)。

G418（又稱(chēng)Geneticin，遺傳霉素）是一種氨基糖苷類(lèi)抗生素，氨基糖苷類(lèi)藥物與核糖體不可逆地結(jié)合，并通過(guò)破壞其校對(duì)能

力導(dǎo)致翻譯提前終止或錯(cuò)譯，從而抑制蛋白質(zhì)合成，阻止敏感細(xì)胞的生長(zhǎng)。

G418對(duì)需氧和兼性需氧革蘭氏陰性桿菌、一些革蘭氏陽(yáng)性菌以及真核細(xì)胞均具有氨基糖苷類(lèi)毒性。因而常被用于篩選表達(dá)氨基糖苷類(lèi)修飾酶的細(xì)胞株。

作用機(jī)制

G418的結(jié)構(gòu)中含有雙堿基環(huán)醇和2-脫氧鏈霉胺，這些結(jié)構(gòu)通過(guò)糖苷鍵與氨基糖連接。G418的獨(dú)特性來(lái)源于其C-6位置的羥基功能，而非氨基功能。這種結(jié)構(gòu)上的差異使得G418能夠與80S核糖體復(fù)合物特異性結(jié)合，相較于其他氨基糖苷類(lèi)藥物，G418對(duì)真核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的抑制作用更為顯著。

篩選應(yīng)用

G418常被用于篩選表達(dá)氨基糖苷類(lèi)修飾酶的細(xì)胞株。這些修飾酶，如氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶（APH），能夠共價(jià)修飾G418的氨基或羥基功能，削弱藥物與核糖體的相互作用，從而產(chǎn)生耐藥效果。當(dāng)真核細(xì)胞成功轉(zhuǎn)染新霉素抗性基因后，它們能夠高效表達(dá)氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶，獲得在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的能力。

推薦使用濃度

G418作為真核翻譯抑制劑的推薦篩選濃度范圍為100-800 μg/mL。然而，有效的殺傷濃度會(huì)因細(xì)胞類(lèi)型、培養(yǎng)基、生長(zhǎng)條件等多種因素而異。因此，為了確保篩選的成功，建議通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定每個(gè)特定培養(yǎng)系統(tǒng)的工作濃度。

康寧廠(chǎng)家介紹

康寧公司是全球領(lǐng)先的生命科學(xué)和材料科學(xué)創(chuàng)新者，其細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品組合包括一系列抗生素和抗真菌試劑產(chǎn)品。這些產(chǎn)品可以滿(mǎn)足從殺菌到抑菌的多種需求，為細(xì)胞培養(yǎng)提供適合的環(huán)境，也可用于微生物或哺乳動(dòng)物細(xì)胞的篩選性培養(yǎng)?？祵幍漠a(chǎn)品以其高質(zhì)量和可靠性而聞名，是科研人員在實(shí)驗(yàn)室研究中不可或缺的工具。