產(chǎn)品詳細介紹：

種屬: 小鼠（Mus musculus）

品系： 未知

組織來源: 胰腺（Pancreas）

疾病: 癌癥（ Carcinoma）

年齡: 成年（Adult）

性別: 未知（Unknown）

細胞形態(tài)： 表皮細胞（Epithelial）

生長特性: 貼壁生長（Adherent）

培養(yǎng)瓶中細胞操作步驟

對于貼壁培養(yǎng)的細胞，寄送前，我們會將培養(yǎng)基充滿整個培 養(yǎng)瓶，以減少產(chǎn)品運輸過程中貼壁細胞的脫落。

1. 收到細胞產(chǎn)品后，請注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置 顯微鏡下仔細檢查是否渾濁、是否細菌污染。因在運輸過程 中存在顛簸，且有些細胞對溫度變化也很敏感，可能存在一些細胞脫落漂浮的情況，這些細胞仍是活細胞，請勿丟棄，可離心富集后傳代使用。

2. 對于貼壁培養(yǎng)的細胞，在生物安全柜環(huán)境中，用真空泵去除培養(yǎng)瓶中的多余培養(yǎng)基，至剩余5-8mL左右，隨后將細胞置于含有5% CO 2的37℃恒溫 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細胞已經(jīng)長滿培養(yǎng)瓶，請立即傳代。

3. 對于懸浮培養(yǎng)的細胞，在生物安全柜環(huán)境中，轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細胞至離心管中，離心200×g / 5 – 10 min，去除上清后，用5 mL 培養(yǎng)基吹散細胞，轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，隨后置于含有5% CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

凍存細胞操作步驟

注意：為保存細胞的高存活率，請收到產(chǎn)品后，立即解凍培養(yǎng)。

1.將凍存管置于37℃ 水浴中來回晃動，迅速解凍。為避免污染，確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速，大約2分鐘。

2.一旦凍存管中液體融化后，立即取出，采用 70%酒精噴拭凍存管表面。從此步開始，后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。

3.將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mL完全培養(yǎng)基的離心管中， 離心200×g / 5 – 10 min，用真空泵去除含有凍存液的上清。

4.用完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細胞復(fù)蘇的存活率，請將培養(yǎng)基在37℃水浴預(yù)熱后使用。

5.將細胞置于含有5%CO2?的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

貼壁細胞傳代培養(yǎng)

1.吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基。

2.加入 0mL?0.25（w/v）Trypsin-0.53mM?EDTA溶液，并置于37℃培養(yǎng)箱中孵育，直至細胞從壁上脫落分離。此過程大約需要3至5分鐘（此處為12.5?cm2培養(yǎng)瓶所用體積，可根據(jù)實際情況增減用量）。

3.加入2mL完全培養(yǎng)基中和胰蛋白酶，并輕輕吹打?qū)⒓毎麖呐囵B(yǎng)瓶表面吹落，并使細胞分散。

4.離心200xg/5min，去除上清后，取適量的培養(yǎng)基將細胞重懸, 取適量懸液置于新的培養(yǎng)瓶中，并加入新鮮細胞完全培養(yǎng)基至總體積為4mL。

5.將細胞置于含有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

6.傳代比例：建議 1:2 至 1:3。

7.培養(yǎng)基換液: 每隔 2至 3天。

266-6細胞ATCC CRL-2151小鼠胰腺腺泡癌細胞培養(yǎng)注意事項

1.收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。

2.仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞因子 等，確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問 題，責任由客戶自行承擔。

3.用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4.靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng)，待細胞匯合度80%左右時正常傳代。

5.請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6.建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細胞僅供科研使用。

參考文獻

References
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