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人原代T細胞轉染好選擇：ProteanFect轉染試劑盒

人原代T細胞在免疫學研究和細胞治療中具有重要應用。ProteanFect作為一種高效的轉染試劑，特別適用于人原代T細胞的基因遞送，能夠實現(xiàn)外源基因的高效表達。本文將詳細介紹使用ProteanFect進行人原代T細胞轉染的實驗攻略。

原代T細胞的分離

從全血或血沉棕黃層的單核細胞（MNCs）或外周血單核細胞（PBMCs）開始，通過陰性選擇或陽性選擇分離得到T細胞亞群，包括CD3+ T細胞、CD4+ T細胞或CD8+ T細胞。

原代T細胞的活化

使用CD3/CD28激活磁珠提供T細胞激活與擴增所需的刺激信號，顯著提高T細胞的活化和擴增效率。

培養(yǎng)與傳代

建議每2天對T細胞進行傳代，保持細胞密度在1×10^6/mL。
在T細胞激活后2-10天進行轉染，最佳轉染時間為激活后4-7天。

轉染操作

使用Opti-MEM培養(yǎng)基（或無血清RPMI 1640/無血清DMEM培養(yǎng)基）進行轉染。
推薦使用ProteanFect Max轉染試劑，它已被證明在人原代T細胞中實現(xiàn)高效和持久的基因表達。

實驗結果

使用ProteanFect Max遞送EGFP mRNA至人原代T細胞，可以在24小時后觀察到強烈的EGFP表達。通過流式細胞術分析，轉染后不同時間點（0.2天、1天、3天、6天、9天、12天）的EGFP陽性細胞比例均保持在高水平，顯示出ProteanFect Max在人原代T細胞中實現(xiàn)持久基因表達的能力。

產(chǎn)品名稱	貨號	單位規(guī)格（試劑B）
ProteanFect轉染試劑盒	PT0100	0.02 mL
ProteanFect轉染試劑盒	PT0101	0.1 mL
ProteanFect轉染試劑盒	PT0103	0.3 mL
ProteanFect轉染試劑盒	PT0105	0.5 mL
ProteanFect轉染試劑盒	PT0110	1.0 mL
ProteanFectMax轉染試劑盒	PT0200	0.02 mL
ProteanFectMax轉染試劑盒	PT0201	0.1 mL
ProteanFectMax轉染試劑盒	PT0202	0.2 mL
ProteanFectMax轉染試劑盒	PT0205	0.5 mL
ProteanFectMax轉染試劑盒	PT0210	1.0 mL

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