RNA降解是一個(gè)常見(jiàn)的問(wèn)題，特別是在進(jìn)行RNA提取和下游分析時(shí)。以下是導(dǎo)致RNA降解的一些常見(jiàn)原因及其相應(yīng)的解決方案：
- 新鮮細(xì)胞: 裂解液不足會(huì)導(dǎo)致裂解不充分，從而使部分RNA未被釋放出來(lái)。為了確保RNA完全釋放出來(lái)，應(yīng)在裂解過(guò)程中加入足夠的裂解液。
- 新鮮組織: 若組織中含有內(nèi)源性核酸酶，則很難避免RNA酶的降解。建議采用的方法是在液氮條件下將組織研磨，并且，在勻漿時(shí)采用更多的裂解液。
-
冷凍樣品: 如果樣品未經(jīng)液氮速冷直接轉(zhuǎn)移到-70℃冰箱存放，會(huì)使RNA緩慢降解。為了避免這種情況，應(yīng)在樣品取材后迅速置于液氮中冷凍存放，然后轉(zhuǎn)移到-70℃冰箱存放。
- 外源RNA酶的污染: 實(shí)驗(yàn)試劑、器械等實(shí)驗(yàn)用品應(yīng)采用DEPC水滅菌處理，以消除外源RNA酶的污染。
- 內(nèi)源RNA酶的污染: 抑制劑失效或者用量不夠，以及實(shí)驗(yàn)樣品過(guò)多或勻漿溫度過(guò)高都可能導(dǎo)致內(nèi)源RNA酶的污染。為了減少內(nèi)源RNA酶的影響，可適當(dāng)增加抑制劑的濃度，確保樣品處理時(shí)處于適宜的溫度。
- 長(zhǎng)時(shí)間暴露于高溫或光照環(huán)境下: RNA容易受到紫外線和高溫的影響而發(fā)生降解，因此在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)避免樣品暴露于高溫或光照環(huán)境下。
- 提取過(guò)程中的反復(fù)冷凍解凍: 這種情況會(huì)破壞RNA結(jié)構(gòu)，使其更容易受到酶的作用而降解。因此，在RNA提取過(guò)程中應(yīng)盡量減少冷凍解凍次數(shù)，最好一次性完成整個(gè)提取過(guò)程。
產(chǎn)品名稱：PAXgene全血RNA管 樣本采集保存
產(chǎn)品貨號(hào)：762165
產(chǎn)品規(guī)格：2.5mL，100支/盒
PAXgene血液RNA管旨在立即穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)RNA，從而產(chǎn)生準(zhǔn)確且可重復(fù)的基因表達(dá)數(shù)據(jù)。PAXgene血液RNA管含有一種專有試劑，可在采集后立即穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)RNA。細(xì)胞內(nèi)RNA在室溫下穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)三天或在2-8°C下穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)五天。PAXgene試管可以在-20°C至-70°C的溫度下冷凍，以便長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
