從源頭穩(wěn)定RNA的IVD級采集管

BD PAXgene 762165采血管基于對全血RNA即時穩(wěn)定需求的深刻理解，具備以下核心特征：

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解決全血RNA分析的四大核心痛點

相較于普通采血管或傳統(tǒng)處理方式，PAXgene Blood RNA Tube的優(yōu)勢顯著：

1. 即時穩(wěn)定，消除離體表達變化

普通采血管中，血細胞離體后基因表達譜會迅速改變（如應激相關基因即刻上調）。PAXgene管內的專利試劑在采血瞬間滲透細胞，立即抑制RNA降解并“凍存”當時的轉錄狀態(tài)，確保所測即所得，避免假性表達變化。

2. 室溫運輸，簡化物流鏈條

無需冷鏈運輸全血樣本：室溫下穩(wěn)定長達3天，使樣本可以從采血點便捷地集中運輸?shù)街行膶嶒炇遥蠓档土宋锪鞒杀九c對低溫運輸設備的要求——尤其適合多中心臨床試驗或第三方檢測機構樣本的跨區(qū)域流轉。

3. 長周期存儲，靈活安排實驗

穩(wěn)定后的血液可在-20℃至-70℃長期凍存，實驗人員無需在采血后立即處理樣本，可按項目進度分批提取RNA，提高了工作流程的靈活性。

4. 標準化IVD系統(tǒng)，減少批間差異

該產(chǎn)品是PAXgene Blood RNA System的核心組成部分，該系統(tǒng)整合了采血→細胞內RNA穩(wěn)定→RNA純化的關鍵步驟，形成了從“血管到結果”的標準化工作流。性能特征已通過FOS和IL1B基因轉錄本的系統(tǒng)驗證，減少了因操作差異引入的批間誤差。

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為基因表達分析帶來切實價值

這些優(yōu)勢將直接轉化為科研與臨床診斷工作中的實際利益：

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堅實的品質背書，值得信賴

BD的所有承諾都基于扎實的驗證數(shù)據(jù)、法規(guī)資質與品牌信譽：

1. 產(chǎn)品驗證證據(jù)

性能特征已確立：使用FOS和IL1B基因轉錄本作為代表性靶標，對PAXgene Blood RNA System的性能進行了系統(tǒng)驗證，覆蓋線性范圍、精密度、準確度等關鍵指標。

穩(wěn)定性數(shù)據(jù)充分：室溫3天、2-8℃下5天的穩(wěn)定時間，以及-20℃至-70℃下的長期存儲條件，均經(jīng)過了系統(tǒng)性的穩(wěn)定性研究確認。

2. 法規(guī)與資質證據(jù)

IVD市場首創(chuàng)：該產(chǎn)品是首-個上市的用于分子診斷檢測的全血采集、運輸、儲存及細胞內RNA穩(wěn)定的閉環(huán)IVD產(chǎn)品，具有里程碑式的法規(guī)地位。

使用前請參閱官方說明書：BD明確提示，使用前應詳細閱讀產(chǎn)品隨附的使用說明書（IFU）、用戶手冊及技術數(shù)據(jù)表，確保符合預期用途與操作規(guī)范。

3. 品牌與應用證據(jù)

BD技術傳承：BD在標本采集領域擁有數(shù)十年的技術積累。產(chǎn)品性能對比（如適用）是基于與舊版BD技術、手動方法或一般性能聲明的比較，體現(xiàn)了持續(xù)的技術迭代。

質量證書可獲取：用戶可通過BD官方渠道獲取產(chǎn)品的質量證書（Quality Certificates），滿足實驗室合規(guī)性審查需求。

結語：從血管到結果的RNA完整守護

在基因表達分析中，數(shù)據(jù)的真實性從血液離開血管的那一刻就已注定。PAXgene Blood RNA Tube (762165) 不僅是一款采血管，更是確保全血RNA從采集點到達檢測儀器時依然“述說真相”的標準化橋梁。

對于正在開展多中心臨床試驗、生物樣本庫建設、分子診斷項目開發(fā)或轉化醫(yī)學研究的機構，選擇PAXgene管，即是選擇了一種可溯源、可重復、可信賴的RNA分析起點。

Q1：PAXgene Blood RNA Tube (762165) 的預期用途是什么？

A：該產(chǎn)品是PAXgene Blood RNA System的核心組成部分，預期用于全血的采集、儲存、運輸，并在封閉的采血管中即時穩(wěn)定細胞內RNA，隨后可從全血中分離純化細胞內RNA，用于下游分子診斷檢測。

Q2：采血后，RNA能穩(wěn)定多長時間？

A：根據(jù)驗證數(shù)據(jù)，采血后的穩(wěn)定性窗口如下：

室溫 (18-25℃)：穩(wěn)定長達3天

冷藏 (2-8℃)：穩(wěn)定長達5天

冷凍 (-20℃至-70℃/-80℃)：可長期儲存，經(jīng)驗證至少可穩(wěn)定50個月

Q3：采血后需要立即處理嗎？為什么手冊說要等2小時？

A：不需要立即處理，但必須等待至少2小時。采血后，將PAXgene管垂直置于室溫(18-25℃)下至少2小時（最多72小時），這是為了確保管內的專利試劑充分裂解血細胞，使RNA完全釋放并被穩(wěn)定。如果采血后直接冷凍或冷藏而未經(jīng)過這2小時的室溫孵育，后續(xù)處理前必須先回溫至室溫并補足2小時孵育時間。

Q4：采血量必須精確到2.5mL嗎？少抽點血可以嗎？

A：不可以少抽。該管的設計采血量為2.5mL，這是實現(xiàn)正確的血液與添加劑比例的關鍵。采血不足會導致比例失衡，可能導致分析結果錯誤或產(chǎn)品性能下降。管內的真空系統(tǒng)設計用于精確采集2.5mL（但實際采血量可能受海拔、溫度、氣壓、靜脈壓和采血技術等因素影響而略有波動）。

Q5：PAXgene管應該在第幾管采血？

A：PAXgene管盡可能不作為第一管采集。如果它是唯·一需要采集的試管，則必須在采集PAXgene管之前，先采集一個丟棄管（Discard Tube），以“預充”采血裝置的管路內部空間，確保后續(xù)采集到PAXgene管中的血量準確（2.5mL）。

Q6：采血后需要混勻嗎？怎么混勻？

A：需要立即混勻。采血后，應立即輕輕地將PAXgene管上下顛倒8-10次，確保管內的添加劑與血液充分混合。不充分混合會導致RNA穩(wěn)定不徹底。

Q7：采血過程中有什么特殊注意事項？

A：為防止血液回流，請遵循以下技術要點：

將供樣者的手臂向下放置

采血過程中保持試管垂直，位置低于供樣者手臂水平

血液開始流入試管后，立即松開壓血帶

確保添加劑在穿刺過程中不接觸塞子或采血針末端

采血完成后等待至少10秒鐘，確保血液已停止流入后再從固定器上取下試管

Q8：未使用的PAXgene管應該如何儲存？

A：未使用的PAXgene Blood RNA Tube應儲存在18-25℃條件下。允許短時溫度偏移至40℃。使用前請檢查包裝上的有效期，請勿使用過期產(chǎn)品。

Q9：如何正確冷凍PAXgene管？

A：冷凍步驟如下：

1.將PAXgene管垂直放置在金屬架中（請勿使用泡沫塑料支架，可能導致試管破裂）

2.先置于?-20℃?冷凍至少24小時

3.然后轉移至?-70℃/-80℃?進行長期儲存

4.冷凍后的PAXgene管需妥善固定在硬紙板凍存盒中（建議使用帶49格隔板的3-4英寸高紙板盒），避免在運輸和處理過程中因碰撞而破裂

Q10：冷凍后的PAXgene管如何解凍？

A：將PAXgene管放在金屬架上，于室溫(18-25℃)?下解凍約2小時。請勿在超過25℃的溫度下解凍。解凍后，小心顛倒混勻10次。如果冷凍前未完成2小時室溫孵育，解凍后仍需在室溫下孵育至少2小時才能繼續(xù)處理。

Q11：PAXgene管在運輸過程中容易破裂嗎？如何避免？

A：冷凍后的PAXgene管如果受到?jīng)_擊，確實可能像玻璃管一樣破裂。為降低風險：

1.將試管妥善固定在硬紙板凍存盒中，使用49格隔板保持穩(wěn)定

2.可用橡皮筋固定盒子，確保其不會在運輸中打開

3.選擇合適尺寸的二級包裝（如Tyvek袋）

4.請勿在同一盒子中混裝不同規(guī)格的試管（如2mL凍存管）

5.用戶應自行驗證其冷凍和運輸方法

Q12：PAXgene管適用于病毒RNA的采集嗎？

A：不適用。PAXgene Blood RNA System不適用于病毒RNA的采集和純化。該系統(tǒng)專為全血中細胞內RNA（如人源血細胞基因轉錄本）的穩(wěn)定和純化而設計。

Q13：PAXgene管必須搭配PAXgene RNA Kit使用嗎？

A：是的。使用PAXgene管采集的血液樣本，必須配合PAXgene Blood RNA Kit進行RNA純化。其他純化系統(tǒng)可能不兼容，導致RNA產(chǎn)量或純度不佳。

Q14：該產(chǎn)品已經(jīng)驗證過哪些基因靶標？

A：PAXgene Blood RNA System的性能特征已通過FOS和IL1B基因轉錄本建立驗證。用戶若需檢測其他目的轉錄本，需自行建立相應的性能特征。

Q15：離心時有什么限制？

A：離心速度請勿超過10,000 × g。過高的離心速度（超過10,000 RCF）可能導致PAXgene管破裂，造成血液暴露和潛在傷害。

作為實驗室搬磚人，每天和BD采血管貼貼，突然靈光一閃——要是咱們實驗室的“顯眼包”BD采血管去測SBTI，會測出什么炸裂人格？今天就來整活，帶大家解鎖BD采血管的隱藏“管”格，順便蹲一蹲和你同人格的那根“管”，華雅生物BD現(xiàn)貨速發(fā)，不用等貨，測完直接沖！

話不多說，前方高能！BD采血管SBTI人格對照表新鮮出爐，快對號入座（嚴肅提醒：梗歸梗，產(chǎn)品信息絕對精準，實驗室人放心抄作業(yè)?。?/p>

BD采血管SBTI人格大賞（附貨號+用途，干貨拉滿）

1. 紅色頭蓋普通血清管（貨號：367812）

搞怪人格：嗎嘍打工人（Malo）——“人生是副本，我只是一只猴，默默干活不喊累”

純純“三無”好管子（無添加劑、無花活、無脾氣），主打一個無私奉獻，像極了實驗室里默默搬磚的嗎嘍打工人。日常負責常規(guī)生化血清檢驗，不管是肝功能、腎功能還是電解質檢測，它都能穩(wěn)穩(wěn)hold住，不搞特殊化，不耍小脾氣，只要你需要，它就安安靜靜待在那里，把血清乖乖分離出來，不添亂、不偷懶，妥妥的實驗室“底層支柱”，性價比拉滿！

2. 金黃色頭蓋惰性分離膠促凝管（SST管，貨號：367955/367983）

搞怪人格：老好人調停者（Mediator）——“看透一切但不拆穿，中間隔離誰也不得罪”

實驗室的“和平使者”非它莫屬！管內含有惰性分離膠和促凝劑，堪稱“社交nb癥”天花板（不是）。采血后能快速促凝，離心后分離膠直接站在中間，把血清和血細胞分得明明白白，互不打擾、互不越界，避免“鄰里矛盾”，讓后續(xù)檢驗更精準。不管是常規(guī)生化還是免疫檢測，它都能從容應對，既照顧到血清的純度，又保護血細胞不被破壞，主打一個“一碗水端平”，誰見了都得說一句“絕絕子”！

3. 淺藍色頭蓋枸櫞酸鈉凝血試驗管（血凝管，貨號：363093）

搞怪人格：強迫癥控制狂（Controller）——“精確到發(fā)絲，絕不允許一絲差錯”

重度強迫癥患者實錘！專門負責凝血四項檢測（凝血酶原時間、凝血酶時間等），管內枸櫞酸鈉抗凝劑濃度精準到0.109M，采血比例絲毫不容偏差，多一滴少一滴都能讓它“CPU燒了”。它的底線就是：絕不允許血液提前凝固，絕不允許檢測結果有偏差，全程嚴格把控每一個細節(jié)，像極了上班時盯著報表、連標點符號都要改三遍的控制狂，有它在，凝血檢測的準確性直接拉滿！

4. 紫色頭蓋EDTA抗凝管（血常規(guī)管，貨號：367861）

搞怪人格：細節(jié)控藝術家（Artist）——“把每個細胞都寵成藝術品，吹毛求疵到極·致”

實驗室的“顏值控+細節(jié)怪”，主打一個“精致到骨子里”！專門用于血常規(guī)檢測，管內EDTA抗凝劑能牢牢保護細胞形態(tài)，不讓紅細胞、白細胞“變形走樣”，哪怕是最細小的細胞碎片，它都能細心呵護。就像顯微鏡下的藝術家，對每一個細胞都吹毛求疵，力求呈現(xiàn)最真實、最完整的細胞狀態(tài)，醫(yī)生靠它判斷血常規(guī)指標，簡直是“火眼金睛”的好幫手，細節(jié)控直接狂喜！

5. 綠色頭蓋肝素抗凝管（貨號：368480）

搞怪人格：急急國王（Speedster）——“風風火火，拒絕磨嘰，主打一個速戰(zhàn)速決”

實驗室的“急性子顯眼包”，急脾氣星人實錘！專門用于急診生化、血漿測定，管內肝素抗凝劑能快速抗凝，不需要漫長等待，采血后就能快速處理樣本，適配急診“與時間賽跑”的節(jié)奏。最討厭磨磨蹭蹭，別人還在慢悠悠促凝，它已經(jīng)搞定血漿分離，堪稱“急診救星”，像極了上班趕地鐵、下班沖外賣的急急國王，主打一個“高效、快速、不拖更”！

6. 灰色頭蓋草酸鉀/氟化鈉血糖管（貨號：367933）

搞怪人格：時間凍結者（Time Freezer）——“管他滄海桑田，我的血糖必須原地封存”

自帶“時間靜止”buff的狠角色！專門用于血糖檢測，管內草酸鉀抗凝+氟化鈉抑糖，雙重保障能讓血糖濃度在室溫下保持24小時穩(wěn)定，不降解、不變化，主打一個“歲月靜好，我自不變”。就像能凍結時間的魔法師，不管外界溫度怎么變，不管樣本放多久，血糖數(shù)值始終精準如一，再也不用擔心樣本放置太久導致檢測不準，糖尿病患者的“福音管”，時間凍結者名不虛傳！

7. PAXgene全血RNA管（貨號：762165）

搞怪人格：碎片收藏家（Collector）——“易碎品守護者，科研界的拼圖高手”

溫柔又強大的“寶藏管子”，專門負責穩(wěn)定和保護RNA，主打一個“護犢子”！RNA有多脆弱，懂的都懂，稍微折騰就會降解，而它就像細心的碎片收藏家，能把脆弱的RNA保護得嚴嚴實實，不被破壞、不被降解，為分子診斷、PCR檢測保駕護航。不管是科研實驗還是臨床檢測，有它在，RNA樣本就能穩(wěn)穩(wěn)留存，堪稱科研界的“拼圖高手”，把破碎的RNA碎片拼成完整的實驗數(shù)據(jù)，誰能不愛？

重點來了！實驗室人必看！

測完了BD采血管的SBTI人格，是不是已經(jīng)找到和你同頻的那根“管”？別著急沖，重點劃重點——

華雅生物，是BD品牌中國區(qū)正規(guī)代理商！文中所有型號BD采血管，我們均有現(xiàn)貨供應，無需漫長等待，不用蹲貨、不用催單，下單即發(fā)，實驗室補貨再也不用慌！

不管你需要“嗎嘍打工人”紅色血清管（367812），還是“急急國王”綠色肝素管（368480），亦或是“時間凍結者”灰色血糖管（367933），華雅生物一站式配齊，正品保障、價格給力！

2.移除頂層的泡沫墊層，露出Gateway設備及其電源線。
3.輕輕從包裝中取出Gateway主機和充電器，同時請務必穩(wěn)固托住設備底部。
4.檢查所有組件是否有可見損壞或缺失。如發(fā)現(xiàn)任何問題，請先聯(lián)系技術支持后再繼續(xù)操作。

后動Gateway

1.請將Gateway設備放置在實驗臺或生物安全柜內(根據(jù)您的工作空間要求決定)。
2搬運設備時，請單手握住拱形手提部位，另一只手托住基座進行支撐。
3.將電源線插入標準電源插座。
4.將電源線另一端連接至Gateway側面的電源接口。
5.將電源開關撥至“ON”開后位置。
a.您將聽到設備開始加壓時內部泵后動的聲音。
b.當內部壓力達到壓力表設定值時，啟動鈕將亮起指示燈。

操作說明

1.設定系統(tǒng)壓力
a.轉動位于Gateway設備側面的壓力調節(jié)旋鈕，即可設定所需壓力值。
b.請觀察設備正面的壓力表，確認已達到設定壓力值;等待系統(tǒng)完成加壓過程。
2.準備樣本收集區(qū)域
a.將開口的1.5毫升收集管放入管架中。
b.將管蓋插入管架側面的蓋槽中;注意避免觸碰管蓋內部，以保持無菌狀態(tài)。
3.準備Microbooster
a.請確認Microbooster耗材的孔徑規(guī)格符合您的實驗要求。
b.請小心撕開Microbooster耗材包裝:從頂部將紙質與塑料封層分離揭開。
C.請確認方向無誤后，將Microbooster耗材輕輕旋轉擰入基座上的鎖扣連接口。
d.請確保Microbooster耗材安裝牢固，但避免過度擰緊。
4.調整管架位置

a.向上拉動管架直至其完全升起，使收集管正好位于Microbooster輸出噴嘴的正下方。

5.開始實驗
a.請確認壓力表讀數(shù)仍處于預設壓力值，如有需要請調節(jié)旋鈕。
b.當啟動鈕指示燈亮起時，請按住按鈕開始實驗。
C.請持續(xù)按住啟動鈕，直至所有組分完全通過Microbooster耗材并轉移至1.5毫升收集管內。
6 .結束流程
a.請輕輕向下按壓試管架，使其回歸初始位置。
b.請沿逆時針方向輕輕旋松Microbooster，將其從Gateway設備上分離。
c.請從蓋槽中取出管蓋，并將其牢固地蓋回收集管上。
d.請從試管架中取出1.5毫升收集管。
7.關閉電源
a.請將電源開關撥至”關閉”(OFF)位置以關閉設備。

市場上的胎牛血清種類繁多，魚龍混雜，使人難以分辨真?zhèn)渭捌焚|。并且為節(jié)節(jié)攀高的胎牛血清價格頭疼不已？還在為時不時斷貨而苦惱？還在糾結用澳洲產(chǎn)血清還是新西蘭源血清？如今，大部分實驗室都還在用胎牛血清或新生牛血清來培養(yǎng)細胞，但是隨著全球胎牛血清血源地減少以及胎牛血清價格的不斷上漲，以及來自動物保護組織的壓力，很多實驗室尤其是干細胞實驗室開始嘗試使用血清替代物來進行細胞培養(yǎng)，這種趨勢從發(fā)達國家美國歐洲開始，他們的實驗室很多都已經(jīng)進行了很多年的血清替代物細胞培養(yǎng)。隨著亞洲尤其是中國科研經(jīng)費的充足以及干細胞研究的興起，國內的無血清細胞培養(yǎng)也蔚然成風。

2005年首次報道人血小板裂解物(HPL)可以代替胎牛血清用于MSCs的大規(guī)模培養(yǎng)和制備，能滿足臨床應用的需求。

隨后有一系列的文章證明HPL能起到FBS的功能，促進MSCs的增殖擴增。這種高效的細胞增殖刺激使MSCs能夠在11-16天的單個培養(yǎng)周期內進行大規(guī)模的臨床應用，而不需要進一步的傳代，同時保持基因組的穩(wěn)定性。

Ultroser G 血清替代品（Ultroser G serum substitute），是美國Pall公司專門針對生物治療、再生醫(yī)學、規(guī)?；竸游锛毎囵B(yǎng)等過程中替代胎牛血清FBS研發(fā)而成，由Pall法國分公司生產(chǎn)，原裝進口中國。

Ultroser G血清替代品具有25余年的應用歷史，自上市以來，受到歐洲和美國眾多科研人員的一致認可，在NCBI和ELSEVIER可搜索到近1000篇相關文獻。隨著全球胎牛血清價格的不斷上漲、干細胞研究的廣泛開展、以及國內科研經(jīng)費的增加，越來越多的實驗室開始使用UltroserG 血清替代品進行細胞培養(yǎng)。

PALL?15950-017血清替代品原瓶原裝進口中國。PALL血清替代品專門針對疫苗生產(chǎn)、抗體制備、細胞治療、規(guī)?；瘎游锛毎囵B(yǎng)研制而成，具有活性高、批次一致的核心優(yōu)勢。

PALL?15950-017血清替代品血清替代品屬于半固定成分，相對于動物制品的胎牛血清，具有多方面的產(chǎn)品優(yōu)勢：

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? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?華雅思創(chuàng)生物

實驗方法:

1. 使用CTS Dynabeads CD3/CD28(磁珠:細胞比例為3:1)在細胞培養(yǎng)袋中分離并激活來自健康供體的PBMC的T細胞，其中CTS OpTmizer T細胞擴增SFM補充有CTS免疫細胞血清替代物，Gibco L-谷氨酰胺和Gibco慶大霉素(不完全培養(yǎng)基)。
2. 在移除磁珠后，在細胞培養(yǎng)板或者細胞培養(yǎng)袋中擴增T細胞。
3. 將分離的和活化的T細胞在完全培養(yǎng)基(不完全培養(yǎng)基加100U/mL IL-2)中擴增7–10天；在刺激后第2，3或5天磁性移除CTS Dynabeads CD3/CD28。
4. 用涂有重組人纖維蛋白試劑的微孔板中的編碼EGFP的γ-逆轉錄病毒轉導T細胞。
5. 使用流式細胞分析軟件在細胞分析儀上進行T細胞的流式細胞術分析。
6. 使用Invitrogen Dynabeads mRNA DIRECT純化試劑盒分離來自T細胞的RNA，并使用Ion AmpliSeq試劑盒通過TCRβ測序對其進行分析。

實驗結果

CTS Dynabeads CD3/CD28磁珠不需要上游T細胞選擇，因為該技術基于CD3和CD28共表達同時分離和激活初始和早期記憶T細胞。流式細胞術分析顯示CD3+ CD28+ T細胞被分離，恢復率高(>90%)(圖2)。在激活后第3天，細胞被均勻刺激(>95% CD25+)并具有高純度(>95% CD3+)(圖3)。

（CTS Dynabeads CD3/CD28優(yōu)先分離CD3+ CD28+ 細胞。將PBMC與CTS Dynabeads CD3/CD28以3:1磁珠:細胞的比例孵育30分鐘，并分析陰性(非分離)級分并用于計算分離效率。A代表性細胞圖，證明CD3+ CD28+ T細胞分離的效率。B恢復實驗總結(n = 9)。）

（用CTS Dynabeads CD3/CD28分離的T細胞被均勻刺激且具有高純度。(A，B)在分析活化標記物之前，將分離的T細胞擴增3天。(C，D)在第0天(起始材料)和激活后第3天和第10天分析T細胞純度。）

（T細胞擴增后克隆多樣性增加。用CTS Dynabeads CD3/CD28分離并活化T細胞。(A)在第0，3和10天，收獲樣品用于TCRβ測序。(B)在一個實驗中，在激活后第3天也用γ-逆轉錄病毒轉導T細胞。）

實驗結論

• CTS Dynabeads CD3/CD28分離CD3+ CD28+ T細胞，效率高，純度高。
• 分離和活化的CD4+和CD8+ T細胞在10天內擴增100至800倍，同時保留年輕表型(CD45RA+/- CD127+/- CD62L+ PD-1-)。
• 基于TCRβ測序，擴增的T細胞具有增加的克隆多樣性。
• 第2天去除磁珠提高了γ-逆轉錄病毒的轉導效率。

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Gibco? ? ? ? ? ? ? ? ? ??11161D? ? ? ? ? ? ? ? Dynabeads Human T-Activator CD3/CD28 for T Cell Expansion and Activation

BioGems? ? ? ? ? ? ? ? ?05121-25? ? ? ? ? ? ?Anti-Human CD3 SAFIRE Purified

獲得高覆蓋度高保真性的全基因組擴增產(chǎn)物是準確全面的測序結果的保障。為了保證基因組高覆蓋度無偏好性的擴增，在單細胞測序技術誕生的近二十年時間里，全基因組擴增技術經(jīng)歷了幾次重大的變革。

WGA主要有三種方式：DOP-PCR，MDA，MALBAC。

下面小編就來為大家介紹一下WGA技術的演變歷程，以及怎樣根據(jù)實驗目的選擇相應的擴增方式。

技術原理：簡并寡核苷酸引物PCR，引物的3′?含6bp的隨機序列，可以隨機的和基因組DNA結合，從而實現(xiàn)對全基因組的擴增。

應用范圍：因為PCR的指數(shù)擴增特性，放大了基因組上不同序列之間的差異，因而導致擴增出的基因組覆蓋度較低。盡管如此，在1M bin size的水平上，DOP-PCR適合對染色體的CNV進行定量。

商品化試劑盒：Sigma-Aldrich, GenomePlex Single Cell Whole Genome Amplification Kit。

技術原理：2001年由Laskin團隊發(fā)明，使用隨機的六聚體引物和φ29DNA聚合酶進行反應，該聚合酶具有很強的鏈置換特性，能夠在等溫的條件下，擴增產(chǎn)生50~100kb的核酸片段。同時由于其3’-5’核酸外切酶活性和校對活性，φ29 DNA聚合酶具有很高的復制保真性。應用范圍：MDA法比DOP-PCR擁有更高的基因組覆蓋度，φ29 DNA聚合酶的高效率及高保真性，使得MDA法在對SNV的分析，以及構建大片段文庫上有著顯著優(yōu)勢。但是，和DOP-PCR相同，MDA法依然是指數(shù)擴增，因此依然存在PCR反應的序列偏好性，然而，和DOP-PCR不同的是，這種偏好性并不能重復，因此MDA法不適合進行CNV的分析。

商品化試劑盒：Qiagen,?REPLI-g?Single?Cell?Kit。?

技術原理：2012年由謝曉亮團隊發(fā)明，擬線性的擴增過程降低了指數(shù)擴增的序列偏好性。擴增引物的5’含有27bp的共同序列，3’是8bp的隨機序列，可以和模板在15~20℃的低溫下結合，經(jīng)過8~12個循環(huán)的擬線性擴增后，再對這些環(huán)狀的擴增子進行指數(shù)擴增。應用范圍：MALBAC法的優(yōu)勢在于，雖然它依然存在一定的序列偏好性，但和MDA不同，MALBAC的這種偏好性在不同的細胞之間是可重復的，因此可以通過對參考細胞標準化后，進行CNV的分析；另外，由于其擴增的均一性，MALBAC法擴增的等位基因敲除率更低。MALBAC的弱點在于，它使用的聚合酶保真性不如φ29，因此MALBAC在檢測SNV時將會出現(xiàn)更多的假陽性；另外，由于它可重復性的序列偏好性，基因組上低擴增的區(qū)域有時會在擴增過程中丟失。

商品化試劑盒：Yikon, Single Cell Whole Genome Amplification Kit; Rubicon, PicoPLEX WGA Kit。

由上述的分析可見，MDA和MALBAC各有優(yōu)劣，實際上在不同的文獻中，研究者也會根據(jù)研究目的的不同，采取不同的方式對基因組進行擴增，以滿足研究的需要。

PicoPLEX^??WGA Kit：用于單細胞文庫構建的全基因組擴增解決方案

PicoPLEX^??DNA-seq Kit：單細胞 DNA 文庫制備技術，適用于 Illumina 所有 NGS 測序平臺

ThurPLEX^??DNA-seq Kit：更高的通量, 更好的性能, 用于所有 Illumina 的 NGS 平臺

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隨著申請量的上升，授權量也 相應上升，但授權率近年來沒有太大波動，基本維持 在30%—40%之間細胞技術越來越受到重視，目前已進入快速生長期。此外，中國干細胞的授權率基本維持在40%—50%之間，高于全球10個百分點。

全球（左）和中國（右）專利技術

從圖中全球干細胞技術生命周期分析中可以看出，干細胞技術一直處于線性上升趨勢，平均斜率為2.7左右，說明干細胞技術現(xiàn)在仍處于發(fā)展階段，2001年之前的20年生長緩慢， 2001年之后的20年快速增長，這與全球干細胞總體趨勢一致。

全球干細胞申請量位居前二十位的國家/地區(qū)，對干細胞的地域分布情況進行分析。

各國家/地區(qū)的申請來看，美國申請5 418件居首位，研究機構及私人企業(yè)的重點研發(fā)，使其成為全球干細胞的領導者；中國和世界知識產(chǎn)權組織緊隨其后，分別為4 843件和4 094件，中國政府近幾年加大了干細胞的研究投入，并將其納入“十三五”國家規(guī)劃和“健康中國2030”綱要；歐洲專利局、日本和韓國位列第三、第四和第五，日本的京都大學和韓國的首爾國立大學在干細胞技術研究上投入較大，并取得了豐碩的成果。

全球和中國干細胞主要競爭者

從全球近十年獲得干細胞發(fā)明專利授權的機構中選取前十位，如圖。從機構性質上看，7家為科研院校，3家為上市公司；從國家分布上看，美國占7名，日本、韓國、中國各占1名。總體來說，各機構的授權量都呈上升趨勢。

總體來看，近十年全球和中國都重點關注間充質干細胞和多能干細胞，包括臍帶間充質干細胞、誘導多能干細胞等，不同點是全球還關注造血干細胞和干細胞制藥，中國關注神經(jīng)干細胞和腫瘤干細胞等。對比前五年（2008—2012年）與后五年（2013—2017年），全球關于核酸下降，生長因子和造血干細胞上升，中國關于多能干細胞和干細胞營養(yǎng)液下降，生長因子上升。

說了那么多，小編給大家推薦一波干細胞研究產(chǎn)品，干細胞藥企推薦哦！

近日，某醫(yī)院有一老年病例，因吃炸醬面時不小心吸入了一粒肉醬后幾天開始發(fā)燒，咳嗽，呼吸困難入院，導致吸入性肺炎！后來經(jīng)過檢測治療發(fā)現(xiàn)為金黃色葡萄球菌肺炎，其痰培養(yǎng)示金黃色葡萄球菌證實吸入性金黃色葡萄球菌肺炎診斷?？磥硎腔颊咴谶M食時吸入了一粒帶有金黃色葡萄球菌的肉醬，而引發(fā)的肺炎！

什么一粒肉醬竟會導致這么嚴重的后果？什么是金黃色葡萄球菌？

金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus ) 是人類的一種重要病原菌，隸屬于葡萄球菌屬(Staphylococcus)，有”嗜肉菌”的別稱，是革蘭氏陽性菌的代表，可引起許多嚴重感染。而對于金黃色葡萄球菌在速凍食品中的存在量，衛(wèi)生部于2011年11月24日公布食品安全國家標準《速凍面米制品》，允許金葡菌限量存在。

金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是一種具有較強攻擊性的常見人類病原菌，隸屬于葡萄球菌屬，可引起多種醫(yī)院感染和社區(qū)感染性疾病，輕者引起化膿性皮膚感染，嚴重時甚至導致各種危及生命的并發(fā)癥，如菌血癥和心內膜炎。金黃色葡萄球菌在環(huán)境中分布廣泛，對外界不利環(huán)境如干燥、低溫等有較強的抵抗能力，極易通過各種途徑污染食品，會引發(fā)金黃色葡萄球菌食物中毒（S.aureus food poisoning，SFP），對食品安全和人類健康造成重大威脅。當金黃色葡萄球菌污染食品后，會在適宜的環(huán)境條件下大量繁殖，與此同時分泌各種毒素或毒力因子，如金黃色葡萄球菌腸毒素（Staphylococcal enterotoxins，SE），大大增加了其侵襲性和致病力。

根據(jù)美國疾病預防控制中心的研究報道，每年在美國由金黃色葡萄球菌導致的食物中毒約有24萬人次，其中1000多人需要住院治療并約10人因此死亡，由該菌引起的食物中毒占整個細菌性食物中毒的33%；在加拿大，這個比例高達45%同。我國每年也會發(fā)生多起該類食品安全事件，給醫(yī)療衛(wèi)生造成巨大壓力。

金黃色葡萄球菌感染危害

當身體被金黃色葡萄球菌感染的時候，體內的白細胞會有所下降，從而導致機體的抵抗力下降，增加患病的風險。

當天氣炎熱的時候，食物易發(fā)生變質，產(chǎn)生大量的金黃色葡萄球菌，從而引起金黃色葡萄球菌感染癥狀，導致出現(xiàn)食物中毒的現(xiàn)象，引起機體產(chǎn)生一些惡心、嘔吐、頭暈等食物中毒反應，嚴重的可能會出現(xiàn)暈厥的現(xiàn)象。

金黃色葡萄球菌對皮膚也會造成傷害，引起皮膚出現(xiàn)潰爛化膿的現(xiàn)象，如果傷口處被金黃色葡萄球菌感染，會使傷口擴散，加重病情，延長傷口的愈合時間，身體出現(xiàn)嚴重的炎癥反應，引起發(fā)熱，惡心等現(xiàn)象。如果血液中含有金黃色葡萄球菌，經(jīng)過大腦后，嚴重會引起腦膜炎，輕者出現(xiàn)頭痛、發(fā)熱、惡心嘔吐等不適癥狀，重者還會出現(xiàn)休克的現(xiàn)象，需要立即搶救才可以。

另外，金黃色葡萄球菌感染后還可能會出現(xiàn)其它方面的疾病，比如引起腸炎、肺炎、心內膜炎等，還可能會引起中毒性的休克、敗血癥等嚴重后果，因此，大家日常需要注意做好個人的衛(wèi)生工作，勤加鍛煉，提高身體的免疫力和抵抗能力。

相關事件

北京市工商局2011年10月19日查出思念牌的三鮮水餃含有金黃色葡萄球菌。

新快報2011年11月4日報道，廣州市工商局公布2011年第三季度三類食品質量檢驗結果，“三全”以及“海霸王”的三款速凍食品也都被驗出含有金黃色葡萄球菌，分別是“三全灌湯水餃(豬肉玉米蔬菜)”、“三全灌湯水餃(三鮮)”以及“海霸王經(jīng)典包心魚丸”。

2012年1月，媒體報道，爺爺因親吻三代單傳的孫子致其感染金黃色葡萄球菌而得敗血癥，最終不治死亡。

控制方法

金黃色葡萄球菌腸毒素的檢測主要有動物試驗、血清學試驗、免疫熒光試驗及酶聯(lián)免疫吸附等方法。

防止帶菌人群對各種食物的污染，需要定期對生產(chǎn)加工人員進行健康檢查，患局部化膿性感染（如疥瘡、手指化膿等）、上呼吸道感染（如鼻竇炎、化膿性肺炎、口腔疾病等）的人員要暫時停止其工作或調換崗位。

防止金黃色葡萄球菌對奶及其制品的污染，牛奶廠要定期檢查奶牛的乳房，不能擠用患化膿性乳腺炎乳牛的牛奶；奶擠出后，要迅速冷至-10℃以下，以防毒素生成、細菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶為原料，注意低溫保存。對肉制品加工廠，患局部化膿感染的禽、畜尸體應除去病變部位，經(jīng)高溫或其他適當方式處理后進行加工生產(chǎn)。

防止金黃色葡萄球菌腸毒素的生成，應在低溫和通風良好的條件下貯藏食物，以防腸毒素形成；在氣溫高的春夏季，食物置冷藏或通風陰涼地方也不應超過6h，并且食用前要徹底加熱。

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2019年底突如其來的新型冠狀病毒，讓我們再次認識到了廣泛分布且種類繁多的病原微生物對人類的威脅。面對一場突如其來的疫情，既要采用科學的手段快速發(fā)現(xiàn)并認識病原微生物，同時也要基于科學的認識制定可行的臨床檢測和治療方案。新興的高通量基因測序技術通過直接對病毒基因組進行全面分析，對于2019-nCoV的首先確認、動態(tài)分析、進化來源以及致病機制、傳播途徑研究等具備了無可比擬的優(yōu)勢。

作為分子生物學領域的行業(yè)領導者，QIAGEN旗下多款經(jīng)典病毒核酸純化試劑盒就以其回收率高、核酸純度高、多樣本兼容性的優(yōu)勢在2019-nCoV實驗檢測環(huán)節(jié)中 做好準備。同時QIAGEN提供了基于不同技術和方法的檢測方案，包括高通量測序技術方案。

除了新型冠狀病毒外，近年來造成人類感染的病原微生物也日益復雜，同時抗菌藥物濫用與細菌耐藥已成為全球關注的焦點。如今，高通量測序已經(jīng)迅速成為臨床實驗室的重要檢測平臺，延展并提高了經(jīng)典微生物方法的檢測能力，

病毒核酸全轉錄組擴增

實際的檢測過程中可能拿到的并非都是最佳樣本，如來自上呼吸道的咽拭子就因其自身病毒含量低而極易造成檢測假陰性。面對這樣的現(xiàn)實困境，我們在提高核酸產(chǎn)量、質量的同時，也可以借助 “全轉錄組擴增技（WTA）”技術對核酸進行均等的放大，解決樣本量不足的難題。

基于QIAGEN充分優(yōu)化改良的 “多重置換擴增（MDA）”技術，REPLI-g WTA Single Cell能夠針對單個細胞或pg級純化RNA進行快速的全轉錄組擴增。區(qū)別于傳統(tǒng)PCR類擴增方法，REPLI-g可在等溫條件下進行均等、高保真的高靈敏度擴增，雙鏈cDNA產(chǎn)物非常適用于下游進行高通量測序（二代或三代測序）、PCR等方法檢測，也多次被運用于類似疫情的檢測方案中，如在2014年西非埃博拉病毒以及2016年中國南方的寨卡病毒疫情方案中，來自中國疾控中心、廣東省疾控中心等單位的研究人員就已將REPLI-g應用在對抗疫情的實戰(zhàn)中。

人源等宿主rRNA去除

疫情檢測所采用的樣本絕大多數(shù)來自呼吸道、血液等，純化后的核酸產(chǎn)物中還存在著大量的人源RNA，占用大量數(shù)據(jù)的同時還會對結果的準確性產(chǎn)生潛在影響。通過對測序的結果進行分析，我們可看到人源rRNA序列占比極高，因此我們可以通過去除人源rRNA等手段來部分解決這一問題。此時，又到了QIAseq FastSelect展現(xiàn)其真正實力的時候了！

借助獨特的“黑科技”，僅需通過簡單的1步加樣以及一段程序性降溫孵育，無需任何純化步驟，便能在14分鐘內完成樣品中人源或其他哺乳動物來源rRNA的高效去除。這一過程可與REPLI-g WTA Single Cell Kit以及幾乎所有其他的逆轉錄試劑盒、RNA建庫試劑盒相兼容，在避免因多步純化而造成病毒核酸損失的同時，還可極為快速地完成rRNA去除這一限速步驟。此外，如果在糞便、肛拭子等樣本中存在較多的細菌組分，我們也同樣可以利用QIAseq FastSelect 5S/16S/23S Kit結合QIAseq FastSelect HMR Kit在一步流程中同時完成全部細菌和宿主rRNA的去除，十分便捷。

產(chǎn)品名稱 ?????????貨號

QIAseq FastSelect -rRNA & -Globin HMR Kit???334386

NGS文庫構建

在完成rRNA去除并對RNA進行逆轉錄反應（含二鏈合成）后，一款高效的建庫試劑盒是完成cDNA樣品文庫構建的測序前關鍵步驟。KAPA?KK8514 DNA HyperPlus文庫構建試劑盒

貨號：KK8514，整合了DNA酶切片段化及文庫構建步驟，所有反應均在一管中完成。酶切片段化可以降低DNA末端損傷，尤其對于FFPE DNA更是如此。

貨號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格

KK8514 KAPA DNA HyperPlus?文庫構建試劑盒，含擴增 96?次

KK8512 KAPA DNA HyperPlus?文庫構建試劑盒，含擴增 24次

KK8513 KAPA DNA HyperPlus?文庫構建試劑盒，PCR-Free 24?次

KK8515 KAPA DNA HyperPlus?文庫構建試劑盒，PCR-Free 96?次

過去幾周來自中國疾控等單位的科學家在其研究中也分別采用了QIAGEN樣本制備（QIAamp Viral RNA Mini Kit，貨號：52904）等解決方案進行了冠狀病毒的測序和基因組分析并相繼發(fā)表在國際頂尖雜志上。

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